同立海源AMMS®MSC試劑盒套裝2.0(無(wú)酚紅)

貨號(hào)：AS-33

同立海源AMMS®MSC試劑盒套裝2.0(無(wú)酚紅)

產(chǎn)品介紹

AMMS^®MSC基礎(chǔ)培養(yǎng)基（無(wú)酚紅）是一款標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)、無(wú)異種動(dòng)物源、無(wú)血清的培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)人間充質(zhì)干細(xì)胞及其原代祖細(xì)胞（MSCs）。AMMS^®MSC細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒2.0（無(wú)酚紅）支持MSCs 的長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)并且能夠保持其多能分化潛能。

AMMS®MSC試劑盒套裝2.0（無(wú)酚紅）套裝組成

AMMS®MSC試劑盒套裝2.0（無(wú)酚紅）產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 適用于原代和傳代培養(yǎng)不同來(lái)源的人間充質(zhì)干細(xì)胞；

2. 保持人MSC快速擴(kuò)增的同時(shí)，維持其表型及多向分化特性；

3. 培養(yǎng)基內(nèi)毒素小于0.25EU/mL；

4. 無(wú)血清培養(yǎng)基和添加物均無(wú)異種動(dòng)物源成分、無(wú)抗生素；

5. 培養(yǎng)基中含谷氨酰an，培養(yǎng)過(guò)程無(wú)需再添加谷氨xian胺。

使用說(shuō)明 

MSC培養(yǎng)基的配制：1、AMMS® MSC添加物2.0置于37℃水浴鍋中至融化后立即拿出，若出現(xiàn)少量絮狀物或渾濁為正?，F(xiàn)象，不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)性能，建議離心去除絮狀物（3400g，3-5min），直接使用或分裝儲(chǔ)存于-20℃，避免反復(fù)凍融。2、將25mL AMMS® MSC添加物2.0加到500mL AMMS® MSC基礎(chǔ)培養(yǎng)基（無(wú)酚紅）中，混勻。 

原代細(xì)胞培養(yǎng)（以臍帶來(lái)源為例）：1、 臍帶洗滌：無(wú)菌有齒鑷轉(zhuǎn)移臍帶至10cm無(wú)菌培養(yǎng)皿中，用醫(yī)用碘伏消毒整根臍帶外表面，轉(zhuǎn)入新的平皿中，加入75%乙醇浸沒(méi)整根臍帶，消毒滅菌后，轉(zhuǎn)入新的平皿中，加入5～10ml氯hua 鈉注she液沖洗，重復(fù)2～3次，去除血zi。

2、無(wú)菌組zhi剪將臍dai剪成約2～3cm數(shù)段，加入5～10ml氯hua鈉注射液洗滌血凝塊，重復(fù)洗滌直至基本去除血zi，洗滌液較清澈。

 3、剔除血管：按血管螺旋走式剔除臍帶的兩條動(dòng)脈，一條靜脈。

 4、分離華通氏膠：用有齒鑷將華通氏膠撕下，放入無(wú)菌平皿中，加入5～10ml氯hua鈉注射液，洗滌膠體。 

5、洗滌膠體：將獲得的膠體轉(zhuǎn)移至50ml 離心管，加氯hua鈉注射液20～30ml,輕輕晃動(dòng)，2000rpm、5min。

 6、膠體稱重：上清液棄去，稱重記錄。 

7、組織勻漿：膠體中加入2～3 ml培養(yǎng)基，用無(wú)菌組zhi剪，在離心管中將組zhi剪切成組織勻漿塊，2000rpm、5min 離心，上清液去掉。

 8、根據(jù)膠體重量，加入適量培養(yǎng)基，定容，吹打均勻，按照每瓶0.5g接種到培養(yǎng)瓶（T75瓶）中， 每瓶8-10ml 培養(yǎng)基（T75瓶）培養(yǎng)。 

9、平置培養(yǎng)瓶使組織塊盡量均勻分布于整個(gè)底面，將培養(yǎng)瓶放置于二氧化碳恒溫恒濕培養(yǎng)箱。培養(yǎng)條件： 37±0.5℃，二氧化碳體積分?jǐn)?shù)為5±0.2% 。

 10、培養(yǎng)第7天，全量換液，合并收集組織塊，離心上清液棄掉。新鮮培養(yǎng)基重懸組織塊，均勻種瓶。

 11、細(xì)胞可見(jiàn)時(shí)間5-9天，細(xì)胞可收獲時(shí)間10-14天。

 12、3 個(gè)以上組織塊附近細(xì)胞融合度達(dá)85%以上，細(xì)胞可收獲，倒出培養(yǎng)上清，使用生理鹽水清洗培養(yǎng)瓶底面 1~2 遍，使用0.05%胰mei或重組細(xì)胞消化液消化細(xì)胞，終止消化后，收集細(xì)胞懸液至離心管，細(xì)胞液過(guò)細(xì)胞篩網(wǎng)去除組織，450g，5min離心，沉淀即為原代收獲細(xì)胞。